DNS 試劑(NY/T 法)操作說明

DNS試劑(NY/T法)由氫氧化鈉、3,5-二硝基水楊酸、酒石酸鉀鈉、酚等配制而成，DNS濃度為6.3g/L，是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一，其檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內還原糖的量與棕紅色產物的顏色深淺程度呈一定比例關系，在540nm處測定棕紅色物質的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關系，利用比色法和標準曲線測得樣品中的還原糖和總糖的含量。DNS試劑也常用淀粉酶、纖維素酶、木聚糖酶等的活性測定。該試劑僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。 

產品名稱：DNS試劑(NY/T法)

產品貨號：XF0284

規格：100ml

儲存條件：室溫，避光

有效期：12個月

用途：農業部標準法DNS試劑。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。3,5-二硝基水楊酸濃度為6.3g/L。

自備材料：

1、蒸餾水、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液

2、剪刀、勻漿器或研缽、50ml 離心管、離心機、水浴鍋或恒溫箱、分光光度計、比色皿

操作步驟(僅供參考)：

1、還原糖的提取：

①稱取植物樣品 0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約 3ml 勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次，洗出液也轉移至該容器。

②50℃水浴 30min，并不時攪拌，以便還原糖徹-底浸出。

③將沉淀和浸出液轉移至 50ml 離心管，4000g 離心。

④留取上清液，向沉淀中加入 20ml 蒸餾水，混勻，再次 4000g 離心。

⑤留取上清液，將 2 次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至 100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測液。

2、總糖的水解和提取：

①稱取植物樣品 0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約 3ml 勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次，洗出液也轉移至該容器。

②向容器中加入 10ml 6M 鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸，并不時攪拌。

③取 2 滴滴加于載玻片上，滴加 1 滴顯色液，檢查水解是否完-全，如已經水解完-全則不顯示藍色。

④水解完畢后，冷卻至室溫，加入 6M 氫氧化鈉溶液，使溶液 pH 至7.4 左右，用蒸餾水定容至 100ml，混勻，4000g 離心或過濾，獲得上清或濾液。

⑤取上清或濾液 10ml，用蒸餾水定容至 100ml，成稀釋 10 倍的總糖水解液(提取液)，取 1ml 總糖水解液，測定其還原糖的含量。