β-葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）測定試劑盒的操作過程

β-葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）測定試劑盒的操作過程

（ 測外源型 比色法）

一、測定原理：

β－葡萄糖醛酸苷酶（β-Glucuronidase，β-GD）作用于專一性底物釋放出游離的酚酞，用比色法測定游離

酚酞的量表示酶的活力。

二、試劑的組成和配制（50T/48 樣）：

試劑一：粉劑×3 支；臨用前每支粉劑中加入 1.0mL 的試劑二（外源性），充分混勻后-20℃以下保存；

試劑二（外源性）：液體 15mL×1 瓶；4℃保存；

試劑三：液體 100mL×1 瓶；4℃保存

試劑四：1umol/mL 酚酞標(biāo)準(zhǔn) 1mL×1 支；4℃避光保存。

三、操作過程：

1、前處理：

10%組織勻漿上清液的制備：準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量（g）:體積（mL）=1:9 的比例，加入 9 倍體積的

生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清液進(jìn)行

測定。

2. 操作表：

四、計(jì)算公式及舉例：

1、單位定義：每毫克組織蛋白在 37℃條件下，每分鐘能催化生成 1μmol 的酚酞的酶量就是 1 個(gè)酶活力單位。

2、計(jì)算公式：

五、測定意義：

β－葡糖醛酸苷酶廣泛存在于機(jī)體組織中，除肝、脾、腎上腺外，胃腸道粘膜含量也較豐富，它具有水解

固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖的生理功能。胃癌組織內(nèi)此酶活力要顯著高于十二指腸潰瘍的胃組織，胃癌組織

內(nèi)此酶含量豐富，主要分布于癌細(xì)胞內(nèi)；胃癌患者胃粘膜表面覆蓋著具有此酶強(qiáng)活力的膜狀物。這樣當(dāng)含豐富

酶的癌細(xì)胞破碎時(shí)，胞漿中此酶即進(jìn)入胃液。測定胃液β－葡糖醛酸苷酶活力對于研究胃癌有重要的意義。

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