革蘭氏染色液的原理！

革蘭氏染色液的原理！

革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，這種染色法是由一位丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭于1884年發明的。未經染色的細菌，由于其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色后細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特征，用以分類鑒定。通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細菌的不同顯色反應是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異，主要是肽聚糖層厚度和結構決定的。經結晶紫染色的細胞用碘液處理后形成不溶性復合物，乙醇能使它脫色。在革蘭陰性細胞染色中，乙醇或丙 酮破壞了胞壁外膜、損傷肽聚糖層和細胞質膜，結晶紫和碘復合物從細胞中滲漏出來，當再用其他染色液復染時，顯現紅色。紅色染料雖然也能進入已染成紫色的G+細胞，但被紫色蓋沒，所以紅色顯示不出來。在革蘭陽性細胞染色中，乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水，導致孔隙變小，由于結晶紫和碘復合物分子太大，不能通過細胞壁，不易脫色，所以保持著紫色。

原理

革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙，因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。