信帆生物銷售組織及血液酸性磷酸酶

信帆生物銷售組織及血液酸性磷酸酶

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測定意義：                           
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸，常見于巨噬細胞的溶酶體內。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
測定原理：
在酸性環境中，ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚，苯酚與4-氨基安替和鐵反應生成紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通過測定510nm吸光度增加速率，來計算ACP活性。
自備儀器和用品：
酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1酶標板和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，變成藍綠色不能使用。
標準品：液體×1支，2μmol/mL酚標準液，4℃保存。
粗酶液提取：
稱取約0.1g組織，加試劑一1mL充分研磨，4oC、10000rpm離心10min，取上清液待測。血液可直接用于測定，如果濃度高的話，用試劑一稀釋。
測定：
1.酶標儀預熱30 min以上，調節波長到510 nm。
2. 試劑二置于37 oC水浴中預熱30 min以上。
3. 空白管：在酶標板中加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后37℃保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標準管：在酶標板中加入4μL標準品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后37℃保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A標準管。
5.對照管：在酶標板中加入40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后37℃保溫15min；加入試劑四120μL，混勻；后加入4μL上清液，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A對照管。
6. 測定管：在酶標板中加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后37℃保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A測定管。
其中標準管和空白管只需做一管，測定管和對照管每個樣均需做。

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