走近臺盼藍染色液

走近臺盼藍基本信息

中英文名稱：臺盼藍（Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍、曲利苯藍

分子式：C34H24N6O14S4Na4

分子量: 960.82

可溶于水（10mg/ml)

臺盼藍是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性。還常用于檢測細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色，而死細胞會被染成淡藍色。

臺盼藍可被巨噬細胞吞噬，故可用于巨噬細胞的活體染色劑。

走近臺盼藍染色液機理

正常的活細胞，胞膜結構完整，能夠排斥臺盼藍，使之不能夠進入胞內；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養中zui常用的死細胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺盼藍拒染現象。

臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數或顯微鏡下拍照后計數，就可以對細胞存活率進行比較的定量。

臺盼藍染色只需3-5分鐘即可完成，并且操作非常簡單。

臺盼藍染色液操作步驟

步驟：(來自supergama)

1、4%臺盼藍母液：稱取4g臺盼藍，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100ml，用濾紙過濾，4度保存。使用時。用PBS稀釋至0.4%。（也可買Gibco的成品）;

2、胰酶消化貼壁細胞，制備單細胞懸液，并作適當稀釋。

3、染色：細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合混勻。（終濃度0.04%）

4、計數：在三分鐘內，分別計數活細胞和死細胞。 1 e7 e* I* S) ^% X8 U$ K- _

5、鏡下觀察，死細胞被染成明顯的藍色，而活細胞拒染呈無色透明狀。

6、統計細胞活力：活細胞率（%）= 活細胞總數/（活細胞總數+死細胞總數）×100%

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